Evaluación de la función de los granulocitos en el síndrome de hiperinmunoglobulinemia E con infecciones recurrentes / Evaluation of granulocyte function in the hyper immunoglobulin E syndrome associated with recurrent infections

El síndrome de hiper-IgE con infecciones recurrentes (SHIEIR) se caracteriza por infecciones de la piel y el aparato respiratorio causadas especialmente por Staphylococcus aureus y algunos hongos, infecciones que se asocian frecuentemente con daño tisular. Para explicar esta evolución clínica se ha documentado en el SHIEIR una deficiencia en la quimiotaxis de las células fagocíticas, pero no se ha evaluado la expresión de las moléculas de adhesión que regulan este fenómeno. Además, a pesar del daño tisular observado en este trastorno, no se ha estudiado la producción de citocinas activadoras de los granulocitos ni la producción de moléculas reactivas derivadas del oxígeno. En seis pacientes con SHIEIR se evaluó la secreción de GM-CSF e IL-5 de las células mononucleares cultivadas con mitógenos y antígenos, la quimiotaxis de los granulocitos inducida por el N-formil-metionil-leucina-fenilalania (FMLP) bajo gel de agarosa, la explosión respiratoria de los granulocitos después de la activación con forbol-miristato-acetato (PMA) determinada por citometría de flujo y la expresión de las moléculas de superficie L-selectina y CD11b en los granulocitos activados con PMA. Además, se determinó la modulación ejercida sobre estas funciones de los granulocitos por el GM-CSF y los sobrenadantes de cultivos. Con respecto a los controles, los pacientes con SHIEIR presentaron una producción normal de GMCSF y un aumento en la secreción basal de IL-5, mientras que no existieron diferencias significativas en la quimiotaxis, la explosión respiratoria y la expresión de L-selectina y CD11b.

Caracterizacion de pacientes con inmunodeficiencias primarias por medio de un programa de vigilancia epidemiologica para la infeccion recurrente: Estudio piloto, Medellin 1994-1999 / Characteristic of recurrent infection patients through epidemiologic surveillance: Medellin 1994-1999

La infección recurrente constituye una causa importante de enfermedad, incapacidad y muerte, y puede ser la manifestación de una susceptibilidad anormal a los agentes infecciosos, como la que se encuentra en las deficiencias primarias y secundarias de la respuesta inmune. Objetivos. Caracterizar el síndrome de infección recurrente en el área metropolitana del Valle de Aburra; detectar todos los casos de inmunodeficiencia primaria responsables de una infección recurrente anormal. Diseño del estudio. Se diseñó un programa de vigilancia epidemiológica para la infección recurrente que define los criterios de selección de los pacientes sospechosos de padecer alguna inmunodeficiencia; además, se establecieron protocolos clínicos y de laboratorio para el estudio de los casos que lo ameritaran, así como los mecanismos de remisión a un lugar de evaluación. Participantes. Las unidades de atención en salud del área metropolitana del Valle de Aburra, departamento de Antioquia, Colombia. Intervenciones. Se difundieron al personal de salud los conocimientos más importantes relacionados con el síndrome de infección recurrente y sus causas. Los pacientes remitidos fueron evaluados clínicamente y por laboratorio para establecer la causa predisponente. Resultados. Entre agosto de 1994 y diciembre de 1999, se evaluaron 422 pacientes remitidos desde diferentes centros de la región, de los cuales 266 (62 por ciento) presentaban un síndrome de infección recurrente anormal; se lograron diagnosticar específicamente 60 casos nuevos de inmunodeficiencias primarias y 28 de inmunodeficiencias secundarias. Las deficiencias predominantes de anticuerpos fueron las más frecuentes (n=46,66 por ciento), seguidas por las deficiencias en la inmunidad celular (30 por ciento) y las alteraciones en la función de las células fagocíticas (n=21,66 por ciento). Conclusiones. El desarrollo de este programa ha permitido caracterizar al nivel local la infección recurrente y detectar en forma temprana los pacientes con inmunodeficiencias primarias, lo que con un manejo adecuado permitirá disminuir el número de infecciones y hospitalizaciones, y en consecuencia la presencia de secuelas.

Hiperinmunoglobulinemia E: Una inmunodeficiencia primaria con compromiso de varios mecanismos de la respuesta immune / Hyperimmunoglobulinemia E: a primary immunodeficiency with compromise of several mechanisms of the immune response

El síndrome de hiperinmunoglobulinemia E (SHIE) es una Inmunodeficiencia Primaria (IDP) de origen desconocido, cuya fisiopatología no ha sido -esclarecida. Sus manifestaciones comienzan en las primeras semanas de vida. Es característico en su expresión clínica el desarrollo de un síndrome de infección recurrente patológica, con neumopatía supurativa y neumatoceles perennes principalmente producidos porStaphylococcusaureus; se encuentran niveles séricos muy elevados de IgE. En nuestras investigaciones sobre la patogénesis del SHIE, la hipótesis propone varias alteraciones como causas importantes para su presentación: Trastornos en la activación y generación de memoria de los linfocitos T, posiblemente debida a una expresión e interacción inadecuadas de las moléculas de superficie involucradas en este fenómeno (CO40L, CO80, CO86, CTLA-4); un patrón de citoquinas diferente, con producción incrementada de IL-13 que sería la responsable del exceso de síntesis de la IgE y del factor estimulante de colonias de granulocitos y monolitos G M-CSF (G M-CS F= Granulocyte-Monocyte Colony Stimulating Factor) el cual modularía la alteración en la función de las células fagocíticas.

Caracterización molecular en pacientes con enfermedad granulomatosa crónica por deficiencia en p47 phox / Molecular characterization in patients with chronic granulomatous disease due to p47phox deficiency

El sistema NAOPH oxidasa es un complejo enzimático transportador de electrones localizado en la membrana de las células fagocíticas. De este sistema hacen parte varias proteínas; un flavocitocromo b558' el cual está conformado por una cadena b (gp91-phox) y una cadena a (p22-phox) y poral menos 3 proteínas citosólicas (p47-phox, p67- phox, p40-phox). Una alteración gen ética en cualquiera de estas proteínas causa el síndrome de Enfermedad Granulomatosa Crónica (EGC). La caracterización de las mutaciones de los pacientes con EGC ha sido fundamental para dilucidar la estructura y función de los componentes del sistema NAOPH oxidasa. En el caso de la p47-phox, se han obtenido hallazgos importantes que la hacen un modelo interesante para estudiar el mecanismo molecular involucrado en regular la expresión y función bioquímica de este sistema. En los pacientes con defecto en la p47-phox investigados hasta ahora, se ha hallado una deleción del dinucleótido GT al comienzo del exón 2 , siendo la mayoría de ellos homocigóticos para esta deleción, la cual posiblemente se debe a eventos de recombinación entre el gen p47 -phox normal y un seudogen recientemente descrito. En el diagnóstico de pacientes no homocigóticos, cualquier mutación encontrada en el análisis del ONA (gONA o cONA) puede representar un cambio sufrido por el seudogen. Por lo tanto, para la identificación precisa del defecto genético es necesario separar el gen normal del seudogen y analizar las secuencias en forma individual. Los pacientes no homocigóticos posiblemente deben tener una segunda mutación en el alelo tipo silvestre diferente a la deleción GT. De otro lado, a través de mutagénesis sitio-dirigida se pueden modificar algunos de los aminoácidos o dominios de la p47-phox, los cuales pueden ser esenciales para su funcionamiento y su relación con la EGC. Con esta metodología, es posible introducir cambios en un gen cuya secuencia es totalmente conocida, el cual es amplificado; las mutantes así generadas pueden dar información acerca de la estructura y función de los genes analizados, observando su efecto sobre la función. De esta manera se puede determinar lo importante que puede ser un cambio estructural en la función de esta proteína.

NADPH oxidase system is an enzymatic electron transport complex localized in the membrane of phagocytic cells. Several proteins belong to this system: A flavocytochrome b558, formed by a b chain (gp91.phox) and an a chain (p22.phox) and, at least, 3 cytosolic proteins (p47.phox, p67.phox and p40 phox). Genetic alteration in any of these proteins causes the syndrome of Chronic Granulomatous Disease (CGD). Characterization of mutations in patients with CGD has been fundamental to elucidate the structure and function of NADPH oxidase system ComponentS. Several findings make p47.phoX an interesting model to study the molecular mechanism involved in regulating the expreSSion and bioChemical function ofthis system. So far, in patients with p47.phoX defect a deletion of dinucleotide GT has been foUnd at the beginning of exon 2; most of them are homocygotic for this deletion which is probably due to recombinant events between normal p47.phoX gen and a recently described pseudogen. Any mutation found when diagnosing non.homocygotic patients (gDNA or cDNA) may represent a pseudogen change. Therefore, for precise identification of the genetic defect it is necessary to separate the normal gen from the pseudogen and to analyze individual sequences. Non.homocygotic patients posibly have a second mutation in the wild type allele different fron GT deletion. On the other hand, through site. oriented mutagenesis it is posible to modify some of the aminoacids or domains of p47.phoX, which may be essential for its function and relationship with CGD. With this method010gy it is possible to introduce changes in a gen whoSe sequence is thoroughly known and which is amplified; mutants So generated can give information concerning the structure and function of the analyzed genes, observing their effect on function. In this way the importance of a structural change on the function of a protein can be determined.

Aumento in vitro de la producción de factor estimulante de colonias por células mononucleares de sangre periférica en los pacientes con síndrome de hiperinmunoglobulinemia E

Objetivos: analizar el comportamiento in vitro de variasa citoquinas relacionadas con la respuesta inmuine en pacientes con SHIE, con asma alérgica y en sujetos normales

Produccion del anion superoxido en polimorfonucleares neutrofilos / Production of superoxide anion in polymorphonuclear neutrophils

La estandarizacion de tecnicas que permitan el analisis nuclear de los polimorfonucleares neutrofilos es importante para determinar, en un momento dado, la capacidad de defensa de un individuo. Uno de los parametros susceptibles de medicion y que se correlaciona positivamente con la capacidad funcional del polimorfonuclear, es la produccion de agentes oxidantes. Especificamente, el anion superoxido es una especie reactiva del oxigeno que se genera durante la explosion respiratoria y sirve como medida de la misma. El anion superoxido puede ser determinado a traves de una reaccion colorimetrica que utiliza el citocromo C como substrato. Este trabajo presenta los resultados de la estandarizacion de un nuevo metodo para la deteccion del anion superoxido con el cual se ahorran significativamente tiempo, reactivos y celulas. Con esta prueba encontramos, en 26 individuos normales, que no hay diferencias en la produccion del anion superoxido en los grupos por edades ni por sexo y el promedio de valores para las celulas en reposo y para las celulas estimuladas fue de 0.81 mas o menos 0.53 y 12.28 mas o menos 0.87 manomoles/10 6 polimorfonucleares/ 30 minutos, respectivamente.

Deficiencia de las celulas fagociticas / Phagocytic cells deficient

Se presenta una revision sobre las deficiencias de las celulas fagociticas; se consigna informacion basica y clinica sobre defectos de la adherencia, la quimiotaxis, la fagocitosis y la actividad microbicida

We present a review of phagocytic-cell deficiency; both clinical and basic Information Is Included for such aspects as defects of adherence, chemotaxis, phagocytosis and microbicidal activities.

Quimiotaxis bajo agarosa: método para medir la quimiotaxis de los polimorfonucleares neutrofilos / Chemotaxis under agarose: method for measuring chemotaxis of polymorphonuclear neutrophils

Conocedores de la importancia de la quimiotaxis de los polimorfonucleares neutrófilos en el proceso de la fagocitosis y del número creciente de informes en la literatura sobre pacientes que presentan diversos cuadros clínicos relacionados con una deficiencia quimiotáctica, realizamos el presente estudio con el objeto de estandarizar una modificación de la técnica de quimiotaxis bajo agarosa descrita por Nelson y colaboradores

Estudio del paciente con infección recurrente [carta] / Study of the patient with recurrent infection [letter]

La Sociedad Colombiana de Alergia e Inmunología está interesada en realizar un registro nacional de pacientes con Inmunodeficiencias; para lo cual ha creado un comité conformado por los doctores Jaime Bernal Villegas, Diana García de Olarte y Francisco Leal. Con el fin de informar a la comunidad médica nacional sobre los criterios básicos para el enfoque diagnóstico y de manejo de estos pacientes, la presente revisión pretende definir los conceptos clínicos y de laboratorio del llamado "Síndrome de Infección Recurrente"